کار با دستگاه اتوآنالایزر
در این مقاله با اتوآنالیزر و نحوه کار با دستگاه اتوآنالایزر آشنا می شویم با ما همراه باشید….
نحوه کار با اتوآنالایزر شامل مواردی به شرح زیر می باشد .
حمل و نقل و وارد ساختن نمونه به دستگاه اتوآنالایزر:
حمل و نقل و وارد ساختن نمونه به دستگاه اتوآنالایزر را با هم بررسی می کنیم …
بعد از تهیه سرم، مقداری از آن به یک ویال کوچک یا کاپ (CUP) منتقل شده و در منطقه نمونه برداری دستگاه قرار می گیرد.
شکل و اندازه کاپ ها یا لوله ها دارای یک فضای مرده (Dead Volume) می باشند که اگر حجم سرم از این مقدار به اضافه مقدار مورد نیاز برای تست های تعریف شده برای آن کمتر باشد، دستگاه قادر به انجام اندازه گیری تست های مورد نظر نخواهد بود.
جنس کاپ ها باید از مواد خنثی مانند شیشیه یا پلاستیک باشد تا با سرم واکنش ندهد. منطقه بارگیری آنالایزر ناحیه ای است که نمومه ها قبل از آزمایش در آن قرار می گیرند و به شکل سینی حلقوی هستند که به آن RACK می گویند. نمونه ها به ترتیب شماره روی RACK قرار می گیرند و دارای جایگاه هایی برای نمونه های اورژآنسی نیز می باشد.
وارد ساختن نمونه به دستگاه ها:
دستگاه ها معمولا با دو روش جریان ممتد یا روش جریان ناپیوسته کار می کنند.
در سیستم های جریان ممتد از پمپ های پریستاتیک استفاده می گردد و در این پمپ ها یک تیوپ لاستیکی بین دو غلطک قرار داشته و حرکت غلطک ها باعث جریان یافتن مایع در درون لوله می شود البته این پمپ ها دارای سرعت کاملا یکنواختی می باشد و با استفاده از تایمر های الکترونیکی زمان روشن شدن و در نتیجه میزان جریان مایع کنترل می گردد.
در سیستم های جریان نا پیوسته (Discrecte) با استفاده از پمپ های خود کار، نمونه و محلول های آزمایش وارد محفظه مخصوصی می شوند.
در این روش از یک سرنگ شیشه ای استفاده می شود که یک پیستون تفلونی در آن قرار دارد (سرنگ همیلتون) کنترل دقیق سرعت مکش و تخلیه این سرنگ بسیار اهمیت دارد، زیرا سرعت زیاد میزان برداشت نادرست باعث عدم صحت در خوانش خواهد شد.
در قسمت پروب نمونه برداری و پروب ریجنت سنسوری جهت تشخیص میزان سطح محلول تعبیه می گردد که به صورت خازنی یا فرکانسی (اثر پوسته) عمل می نمایند.
انتقال محلول ها و نگهداری آن ها:
در یک آنالایزر ریجنت های مختلفی مورد استفاده قرار می گیرند که ممکن است به صورت مایع یا خشک باشند.
سیستم هایی که با ریجنت های مایع کار می کنند مقدار زیادی از محلول ها را که ممکن است برای ساعت ها و حتی روز ها کار دستگاه کفایت کند را در محفظه مخصوصی نگهداری می کنند آنالایزرها دارای خنک کننده هایی بوده که این محفظه را در در دمای پایین نگه می دارند.
سیستم هایی که با ریجنت های خشک کار می کنند دارای ریجنت هایی به صورت قرص های خشک شده هستند. این قرص ها در درون محفظه ای قرار داشته که سرم و رقیق کننده مناسب به آن افزوده می شوند و این کار باعث حل شدن قرص و شروع واکنش می شود.
ریجنت های خشک از نظر قیمت نسبت یه ریجنت های مایع گران تر ولی پایدار تر می باشند و مشکل نگهداری نیز ندارند.
انتقال ریجنت ها به محفظه واکنش نیز همانند انتقال نمونه می تواند با استفاده از پمپ پریستاتیک یا سرنگ همیلتون صورت می گیرد.
لازم به ذکر است در صورتی که برای یک واکنش به بیشتر از یک ریخت نیاز باشد شست و شوی نوک پیپتور ضروری خواهد بود که ای امر به صورت خودکار در آنالایزرها صورت می پذیرد.
در مورد واکنش های شیمیایی زمان انجام واکنش و شرایط گرمایی (incubation) و میزان انتقال و مخلوط کردن مواد واکنش دهنده و ظرف یا محفظه ای که واکنش در آن صورت می پذیرد از عوامل مهم اندازه گیری واکنش ها می باشند.
کووت های شیشه ای پیرکس معمولا نیازی به جایگزینی نداشته مگر آسیب فیزیکی به آن ها وارد شود و کووت های پلاستیکی که چند بار مصرف بوده و حدود چند ماه دوام دارند. کووت ها بعد از خوانش و اندازه گیری توسط محلول های دیترجنت یا محلول های اسیدی یا قلیایی برای چند بار با آب دیونیزه شسته شده و سپس با هوای فشرده خشک می شوند.
در بیشتر دستگاه ها، تشخیص شفاف بودن جدار این کووت ها به طور خودکار و توسط خد دستگاه صورت می پذیرد.
مخلوط کردن نمونه و ریجنت ها نیز توسط تخلیه محلول ها با فشار و استفاده از انرژی اولتراسوند یا توسط میکسر صورت می پذیرد.
دمای واکنش حدود 37 درجه سانتیگراد می باشد که این عمل توسط ایجاد یک محیط در اطراف محفظه های واکنش با دمای یکسان و انتقال دما از محیط به محفظه های واکنش صورت می پذیرد. به این محیط انکوباتور می گویند که انکوباتور ها به صورت حمام آب گرم یا pelletier وجود دارند.
روش های اندازه گیری با دستگاه اتوآنالایزر:
در آنالایزر خای بیوشیمیایی از روش های مختلفی از قبیل فتومتری، فتومتری انعکاسی و الکترو کمیکال جهت اندازه گیری استفاده می گردد.
در روش فتومتری برای اندازه گیری نیاز به یک منبع نور، یک وسیله جداسازی طیف مورد نظر و یک آشکار ساز می باشد.منبع نوری به کار رفته در دستگاه های آنالایزر می تواند لامپ های هالوژن –تنگستن، هالوژن-کوارتزیا زنون باشد.
نور ساطع شده از این منابع حاوی طول موج های 700-200 نانومتر می باشد. لامپ زنون نسبت به لامپ های هالوژن-تنگستن دارای شدت بیشتر و عمر طولانی تر می باشند.
برای جداسازی طیف مورد نظر از فیلترهای تداخلی استفاده می شود این فیلتر ها معمولا دارای پیک عبوری 30 تا 80 درصد و پهنای باند 5 تا 15 درصدی می باشند.
در بعضی از آنالایزرها فیلترهای مورد نیاز در چرخ فیلتر (filter weel) قرار داده شده اند و فیلتر مورد نظر در زمان مناسب توسط نرم افزار سیستم در محل اندازه گیری قرار می گیرد. در برخی دیگر از تکفام ساز ها و شبکه متحرک منشوری یا آینه ای (grating) جهت بدست آوردن طول موج های مورد نظر استفاده می شود.
از دیود های نوری نیز جهت جداسازی و همچنین آشکار سازی طیف مناسب استفاده می گردد. قسمت فتومتری باید بتواند جذب نوری تا A5/2 را قرائت کند میزان noise آن نباید برای یک واحد جذب نوری (1A) بیشتر از 500/0 واحد جذب نوری باشد. محدوده طیفی نیز بین 650-340 نانومتر مناسب می باشد.
روش فتومتری انعکاسی در آنالایزرهایی که دارای ریجنت های خشک می باشند، به کار می رود. اجزاء این سیستم همانند اجزاء سیستم فتومتری می باشد و نور منعکس شده اندازه گیری می گردد و شدت نور ساطع شده (فلورسنت) رابطه مستقیم با غلظت ماده تحریک شده دارد. رایجترین روش الکتروشیمیایی که در آنالایزر ها مورد استفاده قرار می گیرد روش الکترود یون انتخابی (ISE) می باشد.
این روش جهت اندازه گیری سدیم،پتاسیم و کلر مورد استفاده قرار می گیرد. رابطه بین فعالیت و غلظت آن یون در نمونه باید با استفاده از محلول های کالبیر کننده مشخص شود.
پس از ورود نمونه به محفظه حاوی الکترود های رفرانس، الکترود می بایست برای مدت طولانی در تماس با نمونه باشد (بین 7 تا 45 ثانیه) تا به حالت پایدار برسد.
پردازش سیگنال ها و کنترل فرآیند شامل حرکات الکترومکانیکی و ارتباط بین اپراتور و دستگاه، در آنالایزرهای بیوشیمیایی توسط ریز پردازنده ها و نرم افزار های مربوط به آن ها صورت می پذیرد.
اصول کار بدین طریق بوده که سرم آماده شده را دو قسمت Rack ریجنت ها قرارمی دهیم. سپس با معرفی work list (تست های مورد نیاز برای هر نمونه ) دستگاه شروع به کار کرده و جواب ها را به دو صورت پرینت نمایش روی صفحه مانیتور ارائه خواهد داد.
لازم به ذکر است که جهت انجام تست ابتدا باید با قرار دادن blank از میزان کدورت کووت اطلاع به دست آورده، سپس با کالیبره کردن توسط کالیبراتورها مربوط، منحنی مربوط به خوانش هر تست را به دست آوریم و در نهایت توسط کنترل های نرمال و غیر نرمال از دستی کالیبراسیون و سالم بودن کیت ریجنت اطمینان حاصل نمود.
دوره های آموزشی مرتبط
دیدگاه ها بسته شده است
امکان ارسال نظر وجود ندارد.